九鬼静的少年时代同级生五味武久因癌症住院，他对那须田步施压并对待部下和护士无礼。资深护士金谷吉子严厉指导新人柚子，柚子不满并向护士长投诉。由于病情恶化，五味被判定不适合手术，情绪更加不稳定。柚子擅自宣布五味余命，吉子因此扇了她一巴掌。院长药师丸暗示解雇吉子，而九鬼静则试图抚慰五味。

天才外科医生上杉基弘被院长药师丸招聘，但突然提出辞职。那须田步渴望帮助上杉，但未能如愿。柚子对自己是否适合当护士感到怀疑，得知上杉的秘密后，她打算偷拍制作曝光视频。

拥有美国护士资格的那须田步在路边救助了呼吸困难的乒乓球少女浅仓七叶。七叶被送到医院后，步处理时导致其肋骨骨折，七叶的母亲威胁起诉。院长药师丸对步做出谨慎处分，而九鬼静则有自己的理念。此时，七叶突然从病房消失。

原护士八木惠因胰腺癌来到西东京综合医院，请求药师丸进行手术。药师丸决定让那须田步参与手术，并提议正式招募他。围绕惠手术的是非问题，步和九鬼静决裂。医院发生勒索软件攻击，系统瘫痪，步努力保护患者。被解雇的护士们开始处理无法接受诊察的外来患者。惠病情骤变，步希望药师丸执刀，但药师丸没有同意。

《旅行护士2》通过这些复杂的情节展现了医疗行业的种种挑战和人性的多面性。

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